N° 6696 – 19 kaada 1439 (2-8-2018) BULLETIN OFFICIEL 1533
ANNEXE II
Méthodes reconnues de détection et d'analyse microbiologique, chimique, du phytoplancton toxinoqène et des biotoxines marines
(Article 6 de l'arrêté n° 1950-17)
1. Méthode d'analyse microbiologique
L'analyse de l'indicateur fécal Escherichia coli (E. coli) se fait selon la norme NM ISO/TS 16649-3/2006 intitulée « méthode horizontale pour le dénombrement des Escherichia Coli β-glucuronidase positive » ou toute norme équivalente la remplaçant.
2. Méthodes d'analyses chimiques
• Métaux traces
- Mercure total : Analyse directe par spectrométrie d'absorption atomique (DMA) ou après minéralisation, par Spectrométrie d'absorption atomique à générateur d'hydrures ou méthode équivalente publiée ;
- Cadmium, Plomb : analyse après minéralisation, par ICP-MS ou par Spectrométrie d'absorption atomique à four graphite ou méthode équivalente publiée.
• HAP, PCB et dioxines
La teneur en PCB, HAP et dioxines des parties comestibles des produits conchylicoles (corps entier ou toute partie consommable séparément) doit être déterminée par chromatographie en phase gazeuse couplée au détecteur à capture d'électron et à la spectrométrie de masse (GC/ECD, GC/MS) ou par toute autre méthode reconnue.
La teneur en dioxines doit être déterminée par chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse haute résolution (GC/HRMS) ou par toute autre méthode reconnue.
3.Méthode d'analyse des biotoxines
a- Toxines lipophiles (LSP)
L'analyse des toxines lipophiles se fait selon deux méthodes :
a.1. Méthode biologique
Le dosage biologique est réalisé sur souris en utilisant la méthode de référence (EU-harmonised Standard Procedure MBA Lipophilic toxins). L'essai biologique sur souris est utilisé pour détecter l'acide okadaïque (OA), les dinophysistoxines (DTXs), les pectenotoxines (PTXs), les yessotoxines (YTXs) et les azaspiracides (AZAs).
a.2. Méthode chimique
La méthode chimique utilisée pour le dosage des toxines lipophiles est la méthode de référence de chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (UE-Harmonised Standard Operating Procedure for determination of lipophilic marine biotoxins in molluscs by LC-MS-MS).
Cette méthode permet une quantification directe de l'acide okadaïque (OA), dinophysistoxines (DTXs), pecténotoxines (PTXs), yessotoxines (YTXs) et les azaspiracides (AZAs).
b- Toxines paralysantes (PSP)
La teneur en toxines paralysantes (paralytic shellfish poison — PSP) des parties comestibles des produits conchylicoles (corps entier ou toute partie consommable séparément) doit être déterminée conformément à la méthode de référence d'analyse biologique sur souris (EU-Harmonised Standard Operating Procedure for paralytic shellfish poisoning toxins by mouse bioassay).
c- Toxines amnésiantes (ASP)
La teneur totale en toxines amnésiantes (amnesic shellfish poison — ASP) des parties comestibles des produits conchylicoles (corps entier ou toute partie consommable séparément) est déterminée par la méthode de référence de chromatographie liquide à haute performance (EU-Harmonised Standard Operating Procedure for determination of domoic acid in shellfish and finish by RP-HPLC using UV detection).
4.Méthode d'analyse du phytoplancton toxinoqène
L'identification et le dénombrement du phytoplancton toxinoqène se fait sur l'eau de mer par la méthode d'Utermohl (1958) basée sur la technique de sédimentation. L'observation est réalisée par la microscopie inversée et l'identification à l'aide des clés de détermination appropriées.
Liste des espèces de phytoplancton toxinoqène
Diatomées Pseudo-nitzschia spp
Dinoflagellés Dinophysiales : Complexe Dinophysis spp (D. acuminata, D. caudata, D. fortii, D. hastata, D. mitra, D. rotundata, D .saccus, D. acuta) Prorocentrales: Prorocentrum spp (P.lima, P.minimum) Peridiniales: Azadinium spinosum (P. crassipes) Gonyaulacales: Alexandrium spp ( A.catenella, A.minutum, A. ostenfeldi, A.pseudo-gonyaulax, A. tamarense), Protoceratium sp (P.reticulatum), Lingulodinium sp (L. polyedrum), Gonyaulax spinifera Gymnodiniales: Gymnodinium catenatum espèces ichtyotoxiques Gonyaulacales : Ostreopsis spp (O. ovata, O.sciamensis) Gymnodiniales Karenia spp (K.mikimotoi, K.selliformis) Raphydophytes : Chattonella spp (Ch.antiqua, Ch.globosa, Ch.marina, Ch. subsalsa, Ch. verruculosa), Fibrocapsa sp (F. japonica), Heterosigma sp (H. akashiwo)
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